Clonagem TA

Explorámos a técnica de clonagem TA de um gene responsável pela resistência a antibióticos, ou seja, a resistência à canamicina, seguindo os passos básicos envolvidos no processo de clonagem.Contexto da invenção Um requisito essencial para a engenharia genética eficaz de bactérias e outras células propagadas em culturas celulares é a capacidade de selecionar as células com uma alteração genotípica específica. A estratégia de seleção mais comum na tecnologia do ADN recombinante consiste em incluir um marcador de seleção no vetor de clonagem ou no plasmídeo. Um marcador de seleção pode ser um gene clonado ou uma sequência de ADN que permite a separação das células hospedeiras que contêm o marcador de seleção das que não o contêm. O marcador de seleção, juntamente com um meio de seleção adequado, mantém o vetor de clonagem nas células. Caso contrário, uma vez que a replicação de plasmídeos é um fardo energético para o hospedeiro bacteriano, numa cultura em crescimento, as bactérias que perderam o plasmídeo teriam uma vantagem de crescimento sobre as células com o plasmídeo.